Как определить класс эмбриона

День пятый

На пятый день развития эмбрион достигает стадии, которая называется бластоциста. Это значит, что полость внутри эмбриона уже достигла 50% от его общего объема.

В отличие от предыдущих стадий развития, бластоциста состоит из разных клеток:

Трофобласт. Находится снаружи. Эта часть эмбриона отвечает за его внедрение (имплантацию) в слизистую оболочку матки. Из него будет развиваться плацента и прочие внезародышевые оболочки.
Эмбриобласт. Находится внутри. Из этих клеток в дальнейшем сформируются органы и ткани плода.

Некоторым супружеским парам проводят преимплантационную диагностику для раннего выявления хромосомных и генетических мутаций. В таком случае ПГД делают именно на данном этапе, когда часть клеток начинает выступать за внешнюю оболочку.

На данном этапе развития критериями качества эмбриона являются:

размер внутренней полости;
степень проникновения эмбриона за оболочку;
количество и плотность клеток.

Размер внутренней полости оценивается цифрами, два других критерия – буквами.

Исходя из размеров, выделяют шесть степеней зрелости бластоцисты:

Клетки качественного эмбриона должны быть сгруппированными. Представьте себе теннисные мячики, которые упакованы внутри футбольного мяча. Чем их больше, и чем плотнее расположены, тем лучше эмбрион.

Данный параметр отражается буквами:

Оценивается также трофэктодермальный слой. Продолжая аналогию, можно сравнить его с кожей, из которой пошит футбольный мяч. Чем меньше сегментов (клеток), и чем плотнее они расположены, тем лучше.

Данный параметр тоже оценивается буквами латинского алфавита:

А – много клеток;
В – среднее количество клеток;
С – мало клеток.

Соответственно, общая характеристика эмбриона отображается цифрой и двумя буквами. Например, запись 4АА означает, что эмбрион находится на стадии расширенной бластоцисты, внутри содержится много клеток, и снаружи его трофэктодерма тоже представлена большим количеством клеток.

Процесс развития эмбриона очень сложен. Процедура ЭКО считается удачно проведенной, если хотя бы 40% из них на пятый день развития достигли стадии бластоцисты хорошего качества.

Один или два эмбриона переносятся в матку. Остальные можно заморозить. Если текущий протокол ЭКО не завершится беременностью, их можно будет использовать в следующем цикле. В клинике ЭКО при заморозке используется метод витрификации, то есть сверхбыстрого замораживания, что позволяет защитить эмбрионы от повреждения кристаллами льда.

Классификация эмбрионов на стадии бластоцисты.D.Gardner, et al., 1999.

1 степень — ранняя бластоциста, полость бластоцисты меньше половины объема эмбриона.
2 степень — полость бластоцисты больше половины объема эмбриона.
3 степень — полная бластоциста. Полость полностью занимает объем эмбриона.
4 степень — расширенная бластоциста. Полость бластоцисты становится больше и начинает истончаться ZP.
5 степень — трофэктодерма ничинает проникать через ZP.
6 степень — вылупившаяся бластоциста, покинувшая ZP.

А — плотно упакованная с большим количеством клеток.
В — более свободная группировка среднего количества клеток.
С — незначительное количество клеток

Оценка морулы компактизованного эмбриона Tao J et al., HR, V 17, No 6, 2002

(A) Grade 4: эмбрион полностью компактизован. Клеточные мембраны видны нечетко, но ядра различимы.
(B) Grade 3: компактизовано более 75% бластомеров. Эмбрион сохраняет сферичную форму и гладкую поверхность.
(C) Grade 2: частичная компактизация (около 50% бластомеров), аномальная морфология эмбриона.
(D) Grade 1: компактизация менее 50% бластомеров. Различимы фрагменты и некомпактизовавшиеся бластомеры.

Пример записи — (М3) — морула с компактизацией более 75% бластомеров.

5-6-й день развития. С того момента, как полость внутри морулы достигает 50% ее объема, эмбрион называется бластоцистой. В норме формирование бластоцисты допускается с конца 4х по середину 6-х суток развития, чаще это происходит на 5-е сутки. Бластоциста состоит из двух популяций клеток — трофобласт (однослойный эпителий, окружающий полость) и внутренняя клеточная масса (плотный комок клеток). Трофобласт отвечает за имплантацию — внедрение эмбриона в маточный эпителий (эндометрий). Клетки трофобласта дадут в дальнейшем начало всем внезародышевым оболочкам развивающегося плода, а из внутренней клеточной массы будут формироваться все ткани и органы будущего ребенка. Чем больше полость бластоцисты и лучше развита внутренняя клеточная масса и трофобласт — тем больше потенциал эмбриона к имплантации. Когда полость бластоцисты достигает значительного размера, истончившаяся за счет растяжения блестящая оболочка (ZP) разрывается и начинается процесс хэтчинга (выклева) эмбриона из блестящей оболочки. Только после окончания этого процесса бластоциста способна имплантироваться (прикрепиться) в эндометрий матки. Имплантация происходит, как правило, на 6-7 день развития эмбриона.

День первый

Сразу после оплодотворения доктор проверяет признаки того, что процедура ИКСИ, ПИКСИ или ЭКО проходит успешно. Для этого он смотрит, как выглядят пронуклеусы, и оценивает их:

наличие;
количество;
внутреннюю структуру;
симметричность;
внешний вид.

Пронуклеусы – это ядра половых клеток (мужских и женских), которые еще не слились. Изучая их вид, можно оценивать перспективы, качество и жизнедеятельность будущих эмбрионов.

На данном этапе развития эмбрионов может формироваться множество патологий, которые ведут к их гибели. Например:

присутствие одного пронуклеуса вместо двух (оплодотворение не состоится);
наличие трех пронуклеусов (эмбрион нежизнеспособен, так как будет иметь тройной хромосомный набор).

Плохие эмбрионы сразу отбраковывают. Нет смысла их пересаживать. Даже если они не погибают на этапе культивации, организм женщины сам отторгает такие зародыши. В результате если беременность наступает, она очень быстро прерывается. Это происходит уже в первые недели гестации.

Гестация, гестационный возраст новорожденного (от лат. gestatio ношение) — количество полных недель беременности, прошедших между первыми сутками последней менструации роженицы и моментом перерезания пуповины во время родов.

В процессе стимуляции овуляции на первом этапе ЭКО врачи получают не одну, а сразу несколько женских половых клеток.

Все, полученные клетки (ооциты), оплодотворяются методом ЭКО или ИКСИ. Однако в полость матки переносятся не все эмбрионы.

Как правило, это 1-2 самые перспективные, на взгляд эмбриолога, эмбриона.

Качество эмбрионов ЭКО мы оцениваем в основном по их морфологии. Существует множество критериев для оценки:

Число клеток в эмбрионе. В норме оно не должно быть больше или меньше количества, соответствующего дню развития эмбриона.
Степень фрагментации (безъядерные фрагменты цитоплазмы, количество и локализация которых, могут влиять на дальнейшее развитие эмбриона)
Равномерность и синхронность дробления. После слияния яйцеклетки и сперматозоида образуется зигота (оплодотворенная яйцеклетка, которая начинает активно делиться). Данный процесс называют дроблением, а клетки эмбриона – бластомерами. Они должны быть одинаковой формы и размеров.
Наличие в клеточной цитоплазме всевозможных включений или отсутствие таковых.

Также мы обращаем внимание на наличие так называемых мультиядерных бластомеров. Под данным термином подразумевают наличие бластомеров, имеющих не одно, а несколько ядер. В норме таких бластомеров быть не должно.

Существует несколько классификаций качества эмбрионов, находящихся на первых днях развития. Прежде всего, специалист смотрит на количество клеток.

В норме на 2 день развития эмбрион состоит из 2-4 клеток, на 3 день – из 6-8, и на 4 сутки – количество клеток сложно сосчитать, потому что начинается их слияние и эмбрион превращается в морулу.

При описании эмбриона 2-3 дня развития к числу, указывающему на количество бластомеров добавляется и буквенное, отражающее качество и морфологию самих бластомеров, и наличие или отсутствие фрагментации.

А – безъядерные фрагменты отсутствуют, бластомеры ровные, одинакового размера, имеют одно ядро, гомогенная цитоплазма;
В – количество безъядерных фрагментов цитоплазмы достигает 25%, но не превышает данную границу;
С – число фрагментов без ядер находится в пределах от 25 до 50%, есть нарушения в размерах и форме бластомеров, имеются включения в цитоплазме;
D – более 50% безъядерных фрагментов и т.д..

Данное состояние называется тотальной фрагментацией. Такие эмбрионы не используют для переноса в полость матки (за исключением той ситуации, когда нет эмбрионов другого качества, и пациент настаивает на переносе). Надо сказать, что даже в таких случаях может наступить нормальная беременность, только вероятность наступления будет во много раз ниже, чем при переносе эмбрионов качества А или В.

Бластоцистой называется эмбрион 5-6 суток развития. Он состоит из нескольких десятков клеток, соединенных в шаровидное образование с полостью, окруженный оболочкой. После разрыва этой оболочки (хэтчинга) начинается процесс имплантации (внедрения эмбриона в слизистую оболочку матки).

1) Размер бластоцисты, объем ее полости:

Полость занимает менее 50% бластоцисты.
Полость занимает 50% бластоцисты.
Полость занимает более 75% бластоцисты.
Бластоциста, полость которой в 2 раза превышает клеточную массу.
Бластоциста, в которой началось вскрытие оболочки (хетчинг)
Бластоциста, полностью освобожденная от оболочки, готовая к имплантации.

2) Характеристика клеток, из которых будет развиваться зародыш (внутренняя клеточная масса):

A. Клеток много, границы между клетками неразличимы.
B. Клеточные формы различимы, отмечается наличие некоторых незначительных дефектов в них (зернистость, и т.д.)
C. Дефекты в клетках значительные, имеются признаки апоптоза.
D. Дегенерация клеточного состава.

3) Характеристика клеток внешней клеточной массы, которые формируют внезародышевые структуры (плацента, амниотическая оболочка):

A. Клеток много, они расположены в одном слое, без дефектов.
B. Клеточная масса снижена незначительно.
C. Клеток мало, отмечаются дефекты, включения.
D. Дегенеративные процессы.